貨號:10303-1, 包裝:100ML,價格:60元
產(chǎn)品別名:結(jié)晶紫染液(2%)
英文名稱:Crystal Violet Stain solution(2%)
英文別名:Crystal Violet Stain solution(2%)
2%結(jié)晶紫染色液(染細菌)
產(chǎn)品簡介:
2%結(jié)晶紫染色液(染細菌)是革蘭氏染色法中的一種成分,主要由結(jié)晶紫,乙醇,草酸銨等組成,革蘭陽性菌染色中,細胞經(jīng)草酸銨結(jié)晶紫染色后再經(jīng)Gram碘液處理,形成不溶性復(fù)合物,該復(fù)合物不能通過細胞壁,不易被脫色,所以保持紫色,染色后細菌與環(huán)境形成鮮明對比,可以清楚的觀察到細菌的形態(tài),排列及某些結(jié)構(gòu)特征,而用以分類鑒定。
自備材料:
接種環(huán)或挑取細菌的其他工具,酒精燈,載玻片,光學顯微鏡。
操作步驟:
1---按實驗具體要求操作或參考下列革蘭氏染色方法。
2---涂片,取待檢細菌,于載玻片中央涂成薄層或者在載玻片上滴加少許無菌水,取菌與水混合均勻,涂成薄層。
3---干燥,涂片后在室溫下自然干燥,也可在酒精燈上略加溫,使之迅速干燥。
4---固定,手持載玻片一端,標本面朝上,在酒精燈的火焰外側(cè)快速來回移動3-5次,每次1s,溫度不宜過高,防止菌體蛋白變性,放置待涼后染色,也可以用甲醇或乙醇固定。
5---初染,滴加2%結(jié)晶紫染色液(染細菌)染色1-2min,清水沖洗去染色液。
6---媒染,滴加Gram碘液,并覆蓋載玻片室溫放置1-2min,水洗。
7---脫色,滴加脫色液搖動,搖動10-30s,直至流下的脫色液不出現(xiàn)紫色為止,立即用水沖去脫色液,終止反應(yīng)。
8---復(fù)染,滴加沙黃染色液染色,30-60s,水洗。
9---干燥,鏡檢,置油鏡觀察。
染色結(jié)果:
| 革蘭氏陽性菌 | 藍色至紫色 |
| 革蘭氏陰性菌 | 紅色 |
注意事項:
1---涂片之前,應(yīng)事先在背面做好圓圈標記,以便判斷后續(xù)實驗的位置。
2---取細菌時,應(yīng)注意自我防護,拔或塞試管塞時,應(yīng)將試管口通過火焰略加燒灼,最后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。
3---加熱固定涂片時,應(yīng)注意玻片勿太靠近火焰,一般要求玻片溫度不超過60℃,以玻片背面觸及手背皮膚不覺過燙為宜。
4---革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴格掌握脫色程度,脫色時間應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗判斷,脫色過度,陽性菌可被誤染為陰性菌,脫色不夠,陰性菌可被誤染為陽性菌。
5---待檢細菌培養(yǎng)時間會影響染色,陽性菌培養(yǎng)時間過長或已死亡或細菌溶解,常呈陰性。
6---為了您的安全健康,請實驗前穿好實驗服并戴一次性手套。
保存條件:室溫避光

