貨號(hào)：10440-1， 包裝：100U，價(jià)格：180元
貨號(hào)：10440-2， 包裝：500U，價(jià)格：700元
貨號(hào)：10440-3， 包裝：1000U，價(jià)格：1200元
貨號(hào)：10440-4， 包裝：大包裝，價(jià)格：詢價(jià)
產(chǎn)品別名：Sentrin/SUMO-specific protease蛋白酶
英文名稱：SUMO Protease，Ulp
SUMO蛋白酶（SUMO Protease，Ulp）
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
SUMO蛋白酶也稱UIP,是一種具有較高活性的半胱氨酸蛋白酶，它能識(shí)別SUMO蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)，而不是氨基酸序列，因此可以高效而且特異性地將SUMO蛋白從重組融合蛋白上切割下來。SUMO蛋白酶在較寬范圍的反應(yīng)環(huán)境體系中能保持較高的活性，如溫度（4-30℃），PH(5.5-9.5)等，SUMO蛋白酶帶有His標(biāo)簽，便于融合蛋白切割后利用親和層析去除該蛋白酶。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文別名 | SUMO蛋白酶 |
英文別名 | SUMO Protease |
來源 | 大腸桿菌表達(dá) |
標(biāo)簽 | 多聚His標(biāo)簽 |
純度 | 經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析，純度＞90% |
分子量 | 26.55KD |
儲(chǔ)存緩沖液 | 25 mM Tris-HCl pH 8.0、0.1%(NP-40)、250 mM NaCl、500μM DTT、50% 甘油 |
酶活性定義 | 30℃，SUMO Protease 1 小時(shí)酶切 5 μg 含有酶切位點(diǎn)的融合蛋白， 酶切效率達(dá) 85%以上所需的酶量定義為 1 個(gè)酶活力單位，即 1U |
運(yùn)輸和保存方法
干冰運(yùn)輸；-80℃保存,有效期1年；避免反復(fù)凍融。
使用方法
1.在EP管中配制如下反應(yīng)體系
組分 | 體積（反應(yīng)體系可等比例縮減） |
融合蛋白
| 50 μg |
10×Protease Buffer（常規(guī)條件下B1）
| 20 μL |
ddH2O
| to 200 μL |
SUMO Protease （1U/μL） | 10 μL
|
Total volume | 200 μL |
2. 30℃孵育，在1、2、4和6小時(shí)分別吸出20 μL上述反應(yīng)液，置于單獨(dú)的EP管中。
3. 向上述EP管中加入20 μL 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。
4. 樣品全部反應(yīng)完畢后，樣品煮沸5 min，取30 μL進(jìn)行SDS-PAGE分析。確定最佳反應(yīng)時(shí)間。
【注】如融合蛋白要求低溫處理，可將反應(yīng)液置于4℃，延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，并增加SUMO酶用量，以保證酶切效果。
表1. 不同溫度下SUMO蛋白酶切活性
反應(yīng)時(shí)間（h） | 不同溫度下剪切活性（%） | |||
4℃ | 16℃ | 25℃ | 30℃ | |
0.5 | 48 | 73 | 83 | 88 |
1 | 60 | 87 | 90 | 93 |
2 | 71 | 94 | 94 | 95 |
3 | 74 | 95 | 95 | 95 |
注意事項(xiàng)
1.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2.本產(chǎn)品僅作科研用途！